EB病毒抗体精密度样本制备与真实样本要求

国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心近日发布了《“器审云课堂”线下辅导共性问题》的共性问题解答，其中针对系列问题中的第34项作出如下回复：

问题34：EB病毒抗体检测试剂精密度研究时产品如适用机型较多，且涉及多天试验，精密度研究用临床样本需求较多，请问是否可以采用“在混合阴性临床样本中添加分析物”获得不同含量的精密度样本？
答复：不建议采用在阴性临床样本中添加分析物的方式。研究用样本应尽量与预期适用的真实临床样本一致，并按照说明书描述的方式进行样本采集、处理、运输和保存。如特定浓度的样本确实难以获得，可采用不同浓度的阳性样本及阴性样本进行混合。

该答复的核心并不在于禁止所有样本处理，而是强调精密度研究样本应尽量保持与预期临床使用场景一致，尤其是样本基质、采集处理方式和说明书描述之间的一致性。

EB病毒抗体精密度样本制备的审评关注点

精密度研究通常出现在分析性能研究资料中，用于证明检测试剂在不同批次、不同天数、不同操作者、不同仪器或不同检测条件下结果的一致性。对于适用机型较多的EB病毒抗体检测试剂，企业往往面临样本量需求大、目标浓度样本难获得、跨天试验样本稳定性控制困难等问题。

在EB病毒抗体检测试剂注册资料中，审评关注的重点不是样本数量本身，而是样本是否能够代表说明书所声称的预期适用样本。若使用在阴性样本中外源添加分析物的方式，样本中的抗体存在形式、基质背景、干扰物组成及样本处理过程，可能与真实临床阳性样本存在差异，从而影响精密度结果对实际使用场景的支撑力。

该问题也会涉及体外诊断试剂分析性能评估样本来源的合理性。申报资料应说明样本来源、入选标准、阳性水平判定依据、混合前后浓度确认方法，以及样本采集、处理、运输和保存是否与说明书一致。若仅说明“添加分析物获得不同含量样本”，而未论证基质等效性和临床代表性，可能被要求补充样本制备依据、方法学合理性说明或重新提交更接近真实临床样本的研究数据。

多机型多天试验下的资料准备难点

对于适用机型较多、精密度设计跨多天开展的产品，常见痛点在于：目标浓度水平阳性样本储备不足；不同机型之间样本消耗量差异较大；低阳性或临界阳性样本稳定性难以维持；同一批样本跨天使用时，保存条件与冻融次数对检测结果的影响未充分说明。这些问题如果没有在研究方案中提前控制，容易导致精密度数据虽已完成检测，但无法充分支撑产品性能声明。

如采用阳性样本与阴性样本混合的方式制备特定浓度水平样本，建议同步关注混合后样本的均一性和稳定性。虽然精密度样本不同于校准品或质控品，但样本分装、混合、保存和使用过程仍应具备可追溯性；涉及浓度水平控制时，可参考校准品均一性相关思路，说明混合样本在同一研究周期内能够满足检测一致性要求。

同时，跨天试验还应与说明书中的样本保存条件保持一致。若说明书声称样本可在特定温度下保存一定时间，精密度研究中样本的运输、暂存、冻融和检测时间安排，应与体外诊断试剂稳定性储存条件形成逻辑闭环。否则，审评中可能关注精密度波动究竟来源于产品性能、样本降解，还是样本制备方式不一致。

较为稳妥的做法是，在研究方案阶段先确定各浓度水平所需样本类型和样本量，优先使用真实临床阳性样本；对难以获得的特定浓度水平，说明阳性样本与阴性样本混合的必要性、比例设计、浓度确认和基质影响评估。这样可以减少因样本代表性不足、说明书不一致或研究资料解释不充分引发的发补风险。

如果企业在EB病毒抗体类试剂的分析性能研究设计、样本来源论证或多机型精密度资料整理中存在不确定性，可结合产品方法学特点与说明书声称范围进行前置梳理。钦思咨询可协助企业从审评关注点出发，完善研究方案、资料结构和发补应对逻辑。