二代测序预建库试剂组成与注册申报边界审查要点

国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心近日发布了《基于二代测序技术的体外诊断试剂盒，是否应将预建库试剂包含于试剂盒的组成中进行注册申报》的共性问题解答：

预建库试剂一般包含末端修复、接头连接和扩增等预文库制备相关组分，用于完成对基因测序文库的通用处理，后续需采用试剂盒中其他组分进行文库的特异性识别或富集。考虑到预文库制备步骤在基于二代测序技术的检测中为关键步骤，预建库试剂的质量是否稳定，直接影响到检测结果的准确性，若单独拆出，不利于申请人对产品性能的稳定控制。因此，申请人应将预建库试剂包含于试剂盒的组成中进行注册申报。
值得注意的是，医疗器械分类目录中目前已有分类界定的（预）建库试剂，管理类别均为三类，所以，不可将预建库试剂单独拆分进行备案。

该答复将预建库环节置于完整检测系统中评价，其核心不只是试剂盒组成形式，而是申请人能否对文库制备、靶标识别或富集以及最终检测结果之间的质量传递关系实施统一控制。

二代测序预建库试剂组成的审评逻辑与申报边界

预建库试剂承担末端修复、接头连接、扩增等前处理功能，其输出质量会影响后续靶序列识别、富集效率、测序数据质量和结果判读。即使相关组分本身不负责特异性检测，其性能偏差仍可能沿检测流程传递，因此不能仅以“通用处理组分”为由脱离完整试剂盒评价。

这一要求通常涉及注册申请表中的产品组成、综述资料中的检测原理和反应流程、主要原材料研究资料、生产工艺、分析性能评估、阳性判断值研究、稳定性研究、产品技术要求及说明书。上述资料对预建库试剂的名称、功能、规格、使用量和质量控制要求应保持一致，避免出现申报组成未列明，但操作流程或性能研究实际使用该试剂的情况。

申请人应结合体外诊断试剂主要原材料的研究要求，明确预建库试剂所含关键酶、接头、引物、缓冲体系等组分的功能属性、质量标准和供应控制方式。对可能影响建库效率、文库片段分布、覆盖均一性或测序质量的关键组分，还应说明其放行控制项目与成品性能之间的关联。

对于涉及多个建库步骤或配套磁珠处理的检测系统，可参考建库磁珠一体申报所反映的系统性审查思路，重点判断各组分是否共同完成预期用途、是否形成连续检测流程，以及其中任一组分发生变化后是否可能影响最终结果。该内链主题与本问题并非同一申报事项，但二者均涉及建库环节组分边界及整体质量控制。

如果预建库试剂未列入产品组成，却在分析性能试验、临床试验或产品说明书中作为必要试剂使用，审评中可能被质疑检测系统边界不完整、验证样品与申报产品不一致，或者现有性能研究不能覆盖实际销售和使用状态。申请人可能被要求补充组成功能说明、质量控制依据、批间差异研究或完整系统性能验证。

资料准备中的一致性难点与性能验证要求

常见痛点是研究资料之间采用不同的组成名称或规格描述。例如，综述资料将其统称为预建库试剂，产品技术要求按多个独立组分列示，说明书又使用建库试剂或文库制备试剂等名称。名称差异如果未建立清晰对应关系，可能影响产品组成的可识别性，也会增加审评人员核对试验样品和上市产品一致性的难度。

另一类问题是性能验证仅关注最终检出率、准确率或精密度，没有单独分析预建库环节的关键影响因素。申请人应根据检测原理识别建库投入量、片段化或末端修复效果、接头连接效率、扩增循环数、文库浓度、文库片段分布及污染控制等因素，并说明这些因素如何纳入过程控制或成品性能评价。

对于肿瘤相关检测产品，预建库质量还可能影响低频变异检出、覆盖深度和不同变异类型的检测能力。涉及NGS肿瘤伴随诊断试剂检测范围时，应使建库体系验证、检测范围论证、最低检出限和临床样本研究相互衔接，避免最终性能宣称超出预建库体系及后续测序分析流程的验证边界。

此类产品通常按照高风险体外诊断试剂的技术要求进行系统评价，可结合二三类器械上市申报的资料逻辑统筹产品组成、原材料、工艺控制、分析性能、稳定性和临床评价。资料编制重点不是机械增加试验项目，而是证明预建库试剂与其他组分共同构成受控、稳定且可重复的检测系统。

申报前宜建立产品组成与研究资料的横向核对表，逐项核验预建库试剂在注册申请表、综述资料、研究资料、检验样品、临床试验样品、产品技术要求和说明书中的名称、规格及功能描述。同时，应确认全部性能研究均使用拟上市组成和确定版本的生产工艺，必要时对关键组分变更开展桥接或差异影响评价。

如果企业对预建库试剂的组成归属、验证边界或资料一致性判断存在疑问，可由钦思咨询结合检测原理、组分功能和现有研究资料进行系统梳理，形成与产品实际技术特征相匹配的申报资料策略。